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PCR & qPCR

聚合酶链反应

立即了解更多 PCR & qPCR 是什么

聚合酶链反应(PCR = 聚合酶链反应)是一种酶依赖性过程,可体外复制遗传物质 (DNA)。其中包括变性、加成和延伸三个步骤。PCR 几乎可以算得上是所有生命科学实验室的标准方法。它的应用范围很广,如 DNA 克隆、遗传性或传染性疾病诊断、基因功能分析、亲子鉴定或法医分析等。

 

因此,不断开发出更新、更灵敏的派生型。其中最重要的派生型是 qPCR(定量 PCR)。该方法提供了有关扩增 DNA 数量的信息。
BRAND 为极为注重质量和纯度的 PCR 和 qPCR 严苛应用提供无尘室品质的 PCR 耗材。我们对经过验证的 ISO 8 等级的洁净室进行生命监测,并且高度自动化,确保了 BRAND 的 PCR 产品的纯度。独立的 ISO 17 025 认证实验室就我们的 PCR 产品是否含有 DNA、DNase、RNase 和内毒素/热原等进行检测。

 

更多信息请参见下面的 BIO-CERT(R) 质量等级章节。

PCR & qPCR 产品概览

适合您应用的 BIO-CERT® 质量等级

BRAND 的 BIO-CERT® 产品达到高水平质量标准,并且根据具体应用提供质量水平。除了常规认证质量标签外,还提供 PCR、细胞培养和液体处理的特殊质量等级。因此,您可以快速、轻松地找到适合您应用的 BIO-CERT® 产品。

BIO-CERT® PCR 质量具有以下特点:


您还可以了解更多关于 BRAND 其他 BIO-CERT® 质量等级。

适合小中样品量的 PCR 容器

正确的引物、试剂、最佳退火温度和各个 PCR 步骤的理想持续时间——这些是每个用户在进行 PCR 时必须满足的要求。能够稳定地进行 PCR 反应、在随后的常规流程中未出现麻烦,这是完美方法的重要因素。必须进行大量的前期试验,检查各种参数对各个 PCR 的影响。
BRAND 提供多种 PCR 单一容器和 PCR 条。有了该产品,即使是少量
的样品也可以实现优化而经济的工作。

PCR 单个容器

BRAND 所出品 PCR 单个容器的容量为 0.2 和 0.5 ml,是中小样品量的高效解决方案。超薄壁和均匀的容器可以保证 PCR 过程中实现最佳温度传递效果,最佳封闭效果能可靠地防止蒸发。这样,即使试样容积小,也可以取得有说服力的结果。

PCR 条

如果是中型试样处理量,那么尺寸为 8 和 12 的 PCR 带是 PCR 或 qPCR 的灵活解决方案。您可以选择:针对因热循环仪盖子所产生极高压力的拱形盖子,或者用于 qPCR 的扁平盖子。可用手方便地打开和关闭悬挂的盖条,这时自动化装置中单独的盖条和薄膜条会显示其厚度,因为盖子无法阻碍机械手。

适用于中大样品量的 PCR 板

随着不断开发出新的 PCR 方法,所进行的检测数量也在稳步增长。PCR 在许多领域都是标准流程。除了中等样品量之外,高流量应用也越来越重要,以便于节省时间和成本。为了应对不断增长的样品量,简单而安全的移液必不可少。不断追求流程优化、降低材料和试剂的消耗。


凭借 PCR 板领域广泛的产品组合,BRAND 为高流量分析提供了理想的耗材。超薄的壁厚、可以避免相互影响光滑的表面、不同的颜色和形状,这些是覆盖广泛的应用和设备的理想先决条件。凭借标准化的 ANSI/SLAS 格式,确保可在所有普通旋流器中使用。

PCR 板对比

标准型还是低矮型?

  • 标准型:该容器适合大多数典型热循环器、实时 PCR 检测系统和测序仪。
  • 低矮型:由于 PCR 装置上方的空气空间变小了,因此蒸发量也减少了。因此,热循环过程中的反应条件比标准型容器中的反应条件更恒定,特别是对于小体积(≥20 μl)的装置。同时,对荧光检测、低容量和快速 PCR 应用而言,这些容器还具有优势。

无框、半框、全框

  • 无框 PCR 板几乎适合所有市售热循环器。
  • 半框 PCR 板可轻松贴上标签或条形码。
  • 全框 PCR 板刚性特别强,因此最适合用于自动移液系统。

PCR 板和热循环器完美匹配。

BRAND 为您提供诸如 Applied Biosystems®、Biorad® 或 Peqlab® 之类知名品牌所有常见热循环仪的适用耗材。我们的兼容性表格让您一目了然地看到哪些 BRAND PCR 耗材适合您的热循环仪。

条形码

根据需要,我们使用单独的条型码编码您的 PCR 板,比如使用代码 39(默认)、矩阵码或交错式 2of5 码。这样,由于可自动跟踪试样,实验室中的流程效率变得更高。为使用我们的服务,请先填写在线表格: www.brand.de/barcode.

PCR 容器和板

PCR 产品密封方法

对样品进行安全密封,这是 PCR 期间和在之后的测量期间避免脏污和蒸发必不可少的条件。必须选择适合所执行的 PCR 测试类型和所使用的 PCR 容器的密封方法。例如,为了在实时 PCR 中可靠确定数值,需要使用高度透明的薄膜,因为直接在循环器中进行测量。
除了选择正确的密封方法外,移液也是有效保护样品的重要环节。无论是铝箔还是盖条:BRAND 为各种应用提供最佳的密封方法。即使是超小样品量,也有安全而方便的密封方法。

PCR 盖板

使用 PCR 盖条可靠地密封 24、48 和 96 孔 PCR 条和板,有效防止试样蒸发和污染。

封膜

无论是标准 PCR、qPCR 还是 Digital Droplet PCR,任何情况下原材料的选材都精细考究,且体积较小。为了保护样品并同时还保持其敏感性,必须最佳地封闭 PCR。

PCR 密封选件

聚酯薄膜带,自粘性,用于 PCR、qPCR 和存放

Whether standard PCR, qPCR or digital droplet PCR, the source material is always valuable and the volume always low. To protect samples and maintain their sensitivity at the same time,…

封板膜压板,白色,黑色 BRAND-标识,PE 材质

PE. To securely and easily apply self-adhesive films. The sealing paddle helps to…

十二联管管盖,突盖,PP 材质,透明,适用于 PCR 管

使用 PCR 联排管盖可可靠地密封 24、48 和 96 孔 PCR 板,有效保护您的样品防止蒸发和污染。管盖形状针对 BRAND…

关于 PCR 的建议与诀窍

样品量越小,就越能避免蒸发损耗。由于有多种薄膜和密封条可供选择,您始终可以找到一套完美适用的系统,来安全地密封您的 PCR 板和容器。我方应用备注中提供了更多信息。

无论是用于记录测试的 PCR 单个容器,还是用 96 孔或 384 孔板进行标准化过程高通量试验:选择合适的耗材可以为您节省时间和金钱,同时最大限度地减少浪费。了解更多关于我们各种耗材的信息。

BRAND 提供的白色 PCR 产品在 qPCR 中比其他透明管具有更好的效果。再加上有光滑表面,白色底色能最佳地反射荧光信号。

我们的 PCR 架适用于样品制备、0.2 ml 单个容器、8 孔或 12 孔板以及 96 孔 PCR 板。合适的冷却器 PCR 在 4 °C 下大约能将样品保温 3 小时。分离胶在 7 °C 时从紫色变为粉红色。

用户信息

较高温度下进行孵化时,我们建议使用带盖锁的反应容器,以防止容器弹开。


注意: 相对离心加速度 (RZB) 取决于转子的半径和离心机的转速 (rpm)!


常规换算公式
g = RCF = ((RPM)/1000)2 · r · 1.118


G 数字:重力加速度
RZB: 相对离心加速度
(对应 g 数字)
r:转子半径
rpm。 转子每分钟转数(转速)

我们不建议对反应容器进行高压灭菌处理。高压灭菌器可能是一次性产品的污染源。

 

PP 的优点

  • 高耐化学性:反应容器可用于 DMSO 和其他腐蚀性化学品。
  • 良好耐温性:即使在高温环境下,容器也保持稳定,这些产品通常可以在 121 °C (2 bar) 的高温下进行高压灭菌处理,依照 DIN EN 285 标准。
  • 最少润湿:PCR 容器、反应容器和吸头无残留润湿液体,材料具有生物惰性,即生物分子不会附在表面上。

不建议将该反应容器用于长期存放。为此,我们推荐带螺旋帽或低温管的反应容器。

PCR 应用备注

PCR plates support reliable evaporation protection

应用说明 | pdf | 6 MB

Characterisation of antibodies with BRAND PCR plates

应用说明 | pdf | 1 MB

已选

缩写 "q!PCR " 标识可用于定量实时 PCR 的 PCR 一次性用品。这些用品是白色和/或高度透明的产品,适用于实时循环器中荧光信号的敏感检测。

BRAND 提供 PCR 单个容器和条,有圆顶和平盖两种可供客户选择。PCR 板可以用自粘性密封膜或用 TPE 或硅胶材质的密封垫进行密封。

PCR 密封垫的设计适用于无框或半框的 BRAND PCR 板。较之于传统系统,它们可减少高达 75% 的蒸发损耗。其特点是非常灵活、密封性极高、移液器吸头易于刺穿,并且能进行高压灭菌。

否。定量实时 PCR 过程中产生的荧光信号只能通过扁平、高度透明的盖子来检测。适用于定量实时 PCR 应用的 BRAND PCR 产品在销售文件中标有缩写 q!PCR。

不,不能高压灭菌。

PCR 一次性用品是在最先进的洁净室条件下、由高质量的纯聚丙烯制造而成,不添加任何添加剂,并自动包装。独立的实验室会定期检查产品是否含 DNA、RNase 和 DNase。

PCR 密封垫可以在 +121 °C(2 bar,符合 DIN EN 285)温度下进行高压灭菌处理。但硅胶密封垫(产品编号 781408)由于材料收缩,只能高压灭菌 5 次。

PCR 一次性用品由 PP 材质制成。实际上,PP 可以在 121°C(2 bar,符合 DIN EN 285)的高压釜中进行蒸汽灭菌处理。但由于壁很薄,而且高压灭菌器可能是污染源,我们不建议对该产品组采用这种灭菌方式。

对实时 PCR 应用而言,BRAND 新的白色 PCR 产品系列比透明的 8 孔条或板的效果明显更好。该系列的不同产品均采用 Ti02(二氧化钛)均匀上色,从而可以与光滑的表面结合,高效地反射荧光信号。