移液器基础 像专业人士一样进行移液！
微量移液器的准确性在很大程度上取决于操作者的技术。即便是细微的错误也会影响结果，而正确的操作则能实现精确且可重复的结果。从选择合适的移液器到掌握正确的技术：了解其中的关联并认真操作，便能胜任高要求的实验室任务。
在 BRAND 移液器基础中，您将了解微量移液器的工作原理、种类以及正确的使用方法。此外，我们的专家还提供实用的操作技巧和针对高要求应用的解决方案，助力实现可靠、高效的实验室工作流程。
微量移液器如何工作？
我们的微量移液器 Transferpette® 采用空气活塞原理，因此也称为空气活塞移液器。
液体通过一个空气活塞与移液器本体隔离。通过按压移液按钮，移液器内部的活塞被驱动。当活塞上下移动时，会产生负压或正压，从而将液体吸入枪头并再次排出。
优点：
- 精密且准确的移液
- 快速、灵活且高效
- 无污染操作
有哪些类型的微量移液器？
BRAND 的微量移液器分为手动型（Transferpette® S、Transferpette® pro）和电动型（Transferpette® electronic），并提供单通道以及 8 或 12 通道的多通道配置。
如何正确使用移液器？
标准/正向移液
通过将移液按钮按至第一压力点、将吸头浸入液体中并随后将按钮回到初始位置来完成吸液。
为排液，再次将移液按钮按至第一压力点。随后继续按至第二压力点（过行程），以确保全部体积被完全排出。
何时使用正向移液？
“正向”移液是标准方法，移液器在出厂时即按此方法进行校准。对于使用水溶液的标准应用，它通常能提供相对更准确的结果。
反向/后向移液
在反向移液中，移液按钮直接按到第二压力点。随后将移液吸头浸入液体中，并将按钮缓慢回到初始位置，从而吸取到比设定值更大的液体体积。
为排液，将移液按钮按到第一压力点，即可排出设定体积。剩余体积不属于目标体积，应予以弃置。
何时使用反向移液？
在移取性质与水不同（如黏稠、易挥发、易起泡）的液体时，反向移液可能更为合适，并能改善移液结果。
提示
实用技巧
以下实践提示汇总了选择合适吸头、正确准备以及干净规范的移液过程中的关键要点。
移液器与吸头
对于微量移液器，实现最高精密度与准确性的最佳体积范围为标称体积（NV）的 30% 至 100%。当体积低于标称体积的 30% 时，建议改用较小体积规格的移液器。
吸头的适用性可通过密封性（PLT 单元）与体积准确性（参见校准 SOP）的测试来确定。
密封良好的移液吸头对于获得优异的移液结果至关重要。通常情况下，使用移液器制造商的原装吸头（=即出厂校准时的校准吸头）可取得最佳结果。若吸头几何形状有差异，进行适当的调校可能是有益的。
准备
当移液器、吸头与液体处于相同温度时可获得最佳结果。若条件允许，液体在使用前应先与环境温度相适应。
部分吸取的液体会从表面挥发进入空气活塞，从而减少实际可供排出的体积。为使空气活塞达到饱和，每个新装的吸头都应进行预润。这可通过多次吸取并排出液体来完成。根据 ISO 8655，每个吸头至少需要进行五个循环。
正确的移液
1. 吸液时尽量保持移液器垂直（最大 10°。根据目标体积与液体特性调整浸入深度与等待时间。
吸取体积决定了可实际排出的液体量，且尤其容易出错。
斜角浸入吸头会改变枪头内的静水压力，并可能与不当的浸入深度一起影响体积准确性。根据目标体积的不同，移液器需要不同的时间来完全吸入液体。
2. 排液后将吸头在容器壁上擦拭 8–10 mm。
目标体积对应吸头内的完整液体体积，因此需确保完全排液。
体积范围
浸入深度 [mm]
等待时间 [s]
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高要求应用或苛刻条件下的解决方案
移液器在出厂时依据 ISO 8655 在标准化条件下以水进行校准，因而非常适合移取水溶液。在偏离这些条件的情况下，体积准确性可能降低；为获得最佳结果，建议使用外置活塞式移液器，例如 BRAND 的 HandyStep® touch 或 Transferpettor。在使用空气活塞移液器时，以下操作以及临时的用户调节（User Adjustment）可帮助您取得更佳的结果。
如何使用基于水进行校准的移液器可靠移取密度不同的液体？
通过用户调节（user adjustment）进行临时/暂时的体积补偿
背景：
移液器在出厂时是按蒸馏水的密度进行校准的。密度与此不同（例如碘化钾溶液）会影响空气活塞的伸缩，从而影响液体体积。
在高密度条件下，空气活塞由于更高的静水压力会发生伸缩变化，导致无法吸取到设定的完整体积。
如何成功移取黏稠液体？
- 反向移液
- 放慢移液速度并延长等待时间
- 通过用户调节（User Adjustment）进行体积校正
背景：
黏稠液体（例如甘油、油类）因高流动阻力会同时减慢吸液与排液，导致准确移液更加困难。此外，吸头内常常会残留少量体积。
如何在移取挥发性液体时防止滴落？
- 至少对空气活塞预润洗 5 次（使空气活塞达到饱和）
- 反向移液
- 在充分预润洗后，通过用户调节（User Adjustment）进行体积校正
背景：
对于挥发性液体（例如乙醇），部分体积会在未饱和的空气活塞中挥发，使空气活塞膨胀并将液体从吸头中推出。这通常会导致吸头尖端形成液滴。
如何在移取起泡液体时避免泡沫形成？
- 反向移液
- 慢速移液
- 滤芯吸头可帮助防止污染
背景：
起泡液体因气泡的形成会使移液难以做到精确且可重复。
如何移取低表面张力的液体？
- 使用高质量吸头
- 反向移液
背景：
低表面张力的液体易于润湿表面，因而会使液体的完全且均匀排出变得困难。
当无法进行温度平衡时，应如何移取温度敏感的样品？
- 每个移液步骤都更换吸头
- 不要预润洗空气活塞
- 使用用户调节（User Adjustment）
背景：
液体、移液器与环境之间的温差会改变空气活塞状态并降低准确性。比如，在移取低温液体的第一个步骤中，空气活塞会收缩，导致最初吸取的体积偏大。
想了解更多相关原理，请参阅我们的技术说明（Technical Note）。
我们为您整理了一份手册，概括性地概览了移液过程中典型的挑战。
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提示
校准监控与维护
除了移液技术之外，定期的校准与维护对于长期获得良好的移液结果至关重要。根据 ISO 与 GLP 指南的监控要求，体积测量设备必须定期进行准确性检查，并在必要时进行校准/调校。我们建议每 3 至 12 个月至少进行一次体积检测（校准）与维护，周期可根据个体需求进行调整。
在以下情况中，无论既定维护周期为何，都应立即进行维护：
- 液体被吸入到移液器内部
- 在移取水时移液器出现滴漏
- 移液按钮操作阻力明显偏大
- 通过 PLT unit 进行的密封性测试显示可能存在泄漏
- 在h衡量法体积校准中出现异常
更多关于维护的信息，请参阅您的移液器使用说明书以及我们的校准 SOP。
参考文献
Expertenbericht DKD-E 8-2 Analyse der Einflussgrößen auf die Kalibrierung von Kolbenhubpipetten mit Luftpolster, Ausgabe 05/2013, Revision 0, Physikalisch-Technische Bundesanstalt, Braunschweig und Berlin. DOI: 10.7795/550.20250320
Feldmann, R., Lochner, K.H. Influences on volume in piston-operated air-displacement pipettes. Accred Qual Assur 21, 69–82 (2016). DOI: 10.1007/s00769-015-1171-y
ISO 8655, Piston-operated volumetric apparatus